2020-09-25
2020年9月25日，聚焦于基因治療和細(xì)胞藥物研發(fā)公司上海邦耀生物科技有限公司（BRL Medicine Inc.?“邦耀生物”）宣布，首次對(duì)外公布了與浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院合作開展的“PD1敲除非病毒定點(diǎn)整合CD19-CART細(xì)胞治療復(fù)發(fā)難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床試驗(yàn)”取得突破性成果。這是世界上首次利用基因編輯技術(shù)在PD1位點(diǎn)實(shí)現(xiàn)定點(diǎn)整合的CAR-T治療，也是全球首例非病毒定點(diǎn)整合CART細(xì)胞治療淋巴瘤的臨床試驗(yàn)。同時(shí)，最新研究成果已于2020年9月23日在預(yù)印本平臺(tái)medRxiv上公布，由華東師范大學(xué)、浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院和上海邦耀生物共同完成。
PD1定點(diǎn)整合的CD19-CART是邦耀生物利用自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的Quikin CART?平臺(tái)技術(shù)，在不使用病毒載體的情況下，一步制備獲得的CAR-T產(chǎn)品。該產(chǎn)品將PD1免疫檢查點(diǎn)抑制和CART腫瘤殺傷功能合二為一，起到了PD1免疫治療與CAR-T療法聯(lián)合應(yīng)用的效果。
2例患者在治療3個(gè)月后完全緩解
該臨床研究計(jì)劃入組患者15例，目前已可評(píng)估的4例患者在1個(gè)月時(shí)均達(dá)到了部分緩解（PR）的效果，已經(jīng)達(dá)到3個(gè)月評(píng)估時(shí)間的2例患者獲得完全緩解(CR)。
首例獲得完全緩解的患者于2018年診斷為彌漫大B淋巴瘤IVBE期，經(jīng)多次放化療治療后，病情仍未得到有效控制。入組前影像學(xué)顯示左下腹小腸走形區(qū)系膜間隙大小為3.6*3.5cm的病灶，放射性攝取異常增高。2020年5月入組進(jìn)行PD1敲除非病毒定點(diǎn)整合CD19-CART細(xì)胞的回輸治療，治療后28天PET-CT影像學(xué)即顯示FDG代謝較前明顯減低，達(dá)到PR，治療90天后的PET-CT影像學(xué)顯示病灶全部消失，F(xiàn)DG代謝未見增高，達(dá)到CR。
在整個(gè)CAR-T治療過程中未發(fā)生3級(jí)以上不良事件，包括細(xì)胞因子風(fēng)暴和神經(jīng)毒性。回輸后，CAR-T在體內(nèi)擴(kuò)增良好，持續(xù)時(shí)間較長，d90流式檢測(cè)發(fā)現(xiàn)外周血中的CAR-T細(xì)胞仍維持在一定比例。目前2例患者已經(jīng)痊愈出院，仍在接受長期隨訪。
患者治療前后影像學(xué)檢查對(duì)比
該項(xiàng)臨床研究的主要研究者（PI）浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院黃河院長說：“彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤是最常見的非霍奇金淋巴瘤，目前針對(duì)難治復(fù)發(fā)的患者缺乏有效治療手段。今年我們開始探索基于基因編輯技術(shù)的非病毒定點(diǎn)整合型CAR-T的臨床研究，我們非常高興的看到患者經(jīng)過治療后迅速達(dá)到完全緩解狀態(tài)，我們期待這一新型的CART技術(shù)會(huì)為難治復(fù)發(fā)患者帶來更加便捷、安全和確切的長期治療效果。”
邦耀生物CART升級(jí)2.0版，更有效，更安全！
邦耀生物的非病毒定點(diǎn)整合CAR-T技術(shù)(Quikin CART?)，可以在不使用病毒載體的情況下，利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)將CAR元件定點(diǎn)插入到基因組的特定位點(diǎn)，一步實(shí)現(xiàn)基因敲除和CAR的穩(wěn)定整合，屬于邦耀生物2.0版CART的管線產(chǎn)品。
PD-L1/PD1是抑制T細(xì)胞功能的重要免疫檢查點(diǎn)，目前針對(duì)PD-L1/PD1的抑制劑已經(jīng)在多種類型的惡性腫瘤中取得了良好的療效，也有不少研究報(bào)道了PD1敲除可有效增強(qiáng)CAR-T細(xì)胞的功能。非霍奇金淋巴瘤是一種原發(fā)于淋巴組織的血液系統(tǒng)惡性腫瘤，占所有淋巴瘤80%-90%，雖然患者在初次治療后疾病得到緩解，但之后往往出現(xiàn)復(fù)發(fā)。雖然已有CART產(chǎn)品獲批用于復(fù)發(fā)難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床治療，但是總體療效依然有限，而有研究提示抑制PD1通路可能會(huì)帶來更好的臨床效果。
因此，邦耀生物利用Quikin CART?平臺(tái)開發(fā)了非病毒PD1定點(diǎn)整合CD19-CART細(xì)胞，開展復(fù)發(fā)難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床治療。該產(chǎn)品具有CAR均一性穩(wěn)定表達(dá)、PD1基因敲除的兩大優(yōu)勢(shì)，相當(dāng)于PD1抑制劑和CAR-T細(xì)胞的強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)手。在目前已經(jīng)開展的多例臨床試驗(yàn)中，該CAR-T產(chǎn)品體現(xiàn)了出色的安全性和有效性。
傳統(tǒng)CAR-T產(chǎn)品的制備主要使用病毒載體，對(duì)病毒制備工藝提出了很高的要求，這大大增加了CAR-T細(xì)胞的制造成本和難度，阻礙了CAR-T治療的大規(guī)模臨床應(yīng)用；并且價(jià)格十分昂貴，如目前上市的CAR-T產(chǎn)品，諾華的Kymriah定價(jià)為47.5萬美元，Kite的Yescarta定價(jià)為37.3萬美元；此外，由于病毒采用隨機(jī)插入的方式將CAR元件整合到細(xì)胞基因組中，可能會(huì)改變正常基因的表達(dá)，存在癌變的安全隱患。Quikin CART?技術(shù)無需采用病毒載體進(jìn)行細(xì)胞制備，極大減少了CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)成本，同時(shí)避免了隨機(jī)插入的癌變風(fēng)險(xiǎn)。
Quikin CART?技術(shù)只需一步即可同時(shí)實(shí)現(xiàn)T細(xì)胞內(nèi)源基因的調(diào)控和CAR的持續(xù)性表達(dá)。相比于其他CAR-T技術(shù)，具有工藝簡單、生產(chǎn)環(huán)節(jié)少、制備時(shí)間短、產(chǎn)品均一性高等優(yōu)點(diǎn)。該技術(shù)平臺(tái)可以用于多個(gè)免疫檢查點(diǎn)敲除增強(qiáng)型CART細(xì)胞的制備，可以快速生產(chǎn)通用型CAR-T細(xì)胞，可以開發(fā)動(dòng)態(tài)調(diào)控的安全型CART產(chǎn)品等，為今后CAR-T細(xì)胞的多樣化改造提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。
邦耀生物首席科學(xué)家，華東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院劉明耀教授表示：“與傳統(tǒng)的自體CART技術(shù)相比，Quikin CART?技術(shù)可以在不使用病毒的情況下，一步實(shí)現(xiàn)CAR元件在基因組的定點(diǎn)整合和T細(xì)胞內(nèi)源基因的調(diào)控干預(yù)。這意味著CAR-T細(xì)胞的制備工藝、生產(chǎn)環(huán)節(jié)、制備時(shí)間都會(huì)大大簡化和縮短，因此極大降低了CAR-T細(xì)胞的生產(chǎn)成本，同時(shí)減少了病毒隨機(jī)插入引起的致瘤風(fēng)險(xiǎn)，也提高了CAR-T產(chǎn)品的均一性。目前結(jié)果顯示我們制備的非病毒PD1定點(diǎn)整合CD19-CART細(xì)胞具有巨大的治療潛力，在臨床試驗(yàn)中表現(xiàn)出了很好的安全性和緩解率。”
該項(xiàng)目主要負(fù)責(zé)人、論文第一作者，邦耀生物創(chuàng)新CAR-T研發(fā)總監(jiān)，華東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院副研究員張楫欽博士說：“近年來，CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)的不斷成熟和發(fā)展讓我們萌生了將其應(yīng)用于CAR-T治療的想法。通過對(duì)現(xiàn)有CART技術(shù)存在問題的深入剖析，我們意識(shí)到利用基因編輯技術(shù)來制備非病毒定點(diǎn)整合CART細(xì)胞是一個(gè)很有潛力的方向。通過大量的方法嘗試和條件摸索，我們建立了成熟的Quikin CART?技術(shù)平臺(tái)。該技術(shù)不需要使用任何病毒，只需一步即可制備出CART細(xì)胞，具有現(xiàn)有CART技術(shù)不可比擬的諸多優(yōu)勢(shì)。期待今后利用這一技術(shù)平臺(tái)能開發(fā)出更多成功的CAR-T產(chǎn)品，在臨床治療上取得更大的突破。”
據(jù)悉，除了正在開展的非病毒PD1定點(diǎn)整合CD19-CART臨床研究，邦耀生物也正在布局針對(duì)實(shí)體瘤的其他非病毒定點(diǎn)整合CAR-T產(chǎn)品，以期在CART療法上取得更大的突破。
